Akouos, Inc. hat auf der 25. Jahrestagung der American Society of Gene and Cell Therapy nichtklinische Daten vorgestellt. Das Unternehmen präsentierte auf der Tagung zwei nicht-klinische Daten: eine, die die geplante klinische Entwicklung von AK-OTOF, einer Gentherapie zur Behandlung von OTOF-vermitteltem Hörverlust, unterstützt, und eine weitere, die den potenziellen Einsatz von microRNA-Zielorten in adeno-assoziierten viralen Vektoren für die regulierte Genexpression im Innenohr unterstützt. Nichtklinische In-vivo-Expression, Dauerhaftigkeit der Wirkung, Biodistribution/Shedding und Sicherheitsbewertungen unterstützen die klinische Entwicklung von AK-OTOF für OTOF-vermittelten Hörverlust.

Vortragender Autor: Ann E. Hickox, Ph.D. Titel und Raum der Sitzung: Augen- und Gehörkrankheiten; Salon G AK-OTOF ist eine auf AAV-Vektoren basierende Gentherapie, die für die Behandlung von Patienten mit Otoferlin-vermitteltem Hörverlust vorgesehen ist, indem Transgene, die für OTOF kodieren, in die inneren Haarzellen eingebracht werden. Nach der intracochleären Verabreichung und der anschließenden Co-Transduktion von IHCs durch jeden Komponentenvektor rekombinieren die beiden Transgenprodukte, um ein Otoferlin-mRNA-Transkript in voller Länge und anschließend ein Otoferlin-Protein in voller Länge zu erzeugen. Die Ergebnisse dieser Präsentation zeigen: Die intracochleäre Verabreichung von AK-OTOF in Otoferlin-Knockout-Mäusen oder seiner markierten Version (AAVAnc80-FLAG.hOTOF) in nicht-menschlichen Primaten (NHPs) führt zu einer Expression des menschlichen Otoferlin-Proteins in voller Länge nur in den Ziel-IHCs; die Expression von menschlichem Otoferlin in den IHCs von Ofof -/- Mäusen stellt die Hörfunktion bereits zwei Wochen nach der Verabreichung wieder her und die Wiederherstellung war mindestens sechs Monate lang dauerhaft.

AK-OTOF wurde sowohl bei Mäusen als auch bei NHPs systemisch und lokal gut vertragen, und es wurden keine unerwünschten Wirkungen in der klinischen Pathologie, der Otopathologie, der systemischen Histopathologie oder der Hör- oder Cochleafunktion beobachtet. Es wurde eine begrenzte systemische Exposition von AK-OTOF nach intracochleärer Verabreichung beobachtet, und es wurde keine Otoferlin-Proteinexpression in allen untersuchten Nicht-Zielgewebetypen festgestellt, einschließlich derjenigen mit nachweisbaren Mengen an Vektorsequenzen und Otoferlin-mRNA-Expression. Zusammengenommen unterstützen diese nicht-klinischen Studien die geplante klinische Entwicklung von AK-OTOF für die Behandlung von OTOF-vermitteltem Hörverlust.

Bei der Entwicklung von AAV-Gentherapievektoren besteht ein Ziel darin, sichere und wirksame Produktkandidaten zu entwickeln, die eine gezielte Transgenexpression ermöglichen. Ubiquitäre Promotoren können eine starke, weit verbreitete Expression im Innenohr von Mäusen und NHPs bewirken. Diese Expression kann im gesamten Innenohr gut toleriert werden, wie es bei den ersten beiden Programmen von Akouos, AK-OTOF und AK-antiVEGF, der Fall ist.

Für einige Transgene, wie z.B. GJB2, bei denen die Expression in einem Teil der Nicht-Zielzellen nicht gut toleriert wird, kann die Hinzufügung von selektiven cis-regulierenden Elementen erforderlich sein. Diese nicht-klinische Studie untersuchte den potenziellen Einsatz der miR-TS-Inkorporation in AAV-Vektoren zur De-Targeting-Expression von Transgenen in verschiedenen Zelltypen der Cochlea. Anhand eines In-vitro-Modells wurde die Expression von Transgenen mRNA und Protein in Anwesenheit oder Abwesenheit der Zielorte bewertet.

Akouos identifizierte mehrere microRNA-Zielorte, die verschiedene unterschiedliche Expressionsmuster bewirken. Er zeigte, dass eine Kombination aus AAVAnc80 und miR-TS die Expression in Stützzellen steuern kann, während die Expression in Haarzellen in Cochlea-Explantaten begrenzt wird. Zukünftige Arbeiten werden sich auf die Evaluierung der miR-TS-Regulierung in vivo und die Identifizierung von Kombinationen verschiedener miR-TSs konzentrieren, um das De-Targeting in bestimmten Zelltypen zu verbessern, in denen zum Beispiel die Expression durch ubiquitäre Promotoren nicht gut toleriert wird.